找寻细胞系的基因信息
- 国家生物医学实验细胞资源库BMCR：简单查询每种细胞系的培养条件，具体还需参考各来源实验室/公司SOP。网址：http://cellresource.cn/index.aspx
- Cellosaurus数据库：免费查询STR等信息。网址：https://www.cellosaurus.org/index.html
- 免费使用的国外网站，该网站信息量适中，能提供细胞生长过程的静态、动态图片。网址：https://cellbank.nibn.go.jp/english/cellsearch_e（这个没有GL261等）
- 蛋白信息，很全：https://www.proteinatlas.org/
细胞培养瓶与估算细胞量
培养器皿的材料和种类
细胞培养容器一般有玻璃和塑料的，玻璃材质的优点是易于细胞生长和清洗，可反复使用。塑料的优点是价格便宜，一次性使用，减少污染风险。玻璃器皿需要高温消毒灭菌，且由于人懒，现在一般都使用塑料器皿。目前实验室中最常用的塑料是聚苯乙烯（PS），低成本、较为惰性。PS材质本身是疏水性的，因此非常适合悬浮细胞培养。但是培养贴壁细胞时则必须经过特殊处理，以便细胞附着和铺展，此步骤称为组织培养处理（Tissue Culture Treated-TC处理）。
关于TC处理：是通过物理或化学方法改变聚苯乙烯材料的表面特性，包括表面电荷分布、亲水性和微观拓扑结构三个维度。确保表面粗糙度和蛋白质吸附量达到一定标准，且γ射线处理后仍然保留特性。TC处理的器皿非常适合培养贴壁细胞，当然也可以培养悬浮细胞。玻璃本身就较为宏观亲水，塑料器皿重复使用、第一次倒水就会会破坏TC处理的亲水层，所以不能重复使用。
培养皿：细胞培养皿容器较浅，操作方便。常用于细胞的生长和繁殖。培养皿有多种尺寸（单孔或多孔）可供选择，根据底面直径命名，常用的有6cm、10cm大小（上图这个面积对吗？）。从培养皿中选择单个细胞集落更为容易，操作也更加方便。但由于开口较大，污染风险也相应较高。
培养瓶：有透气盖和密封盖，根据细胞对氧气的需求不同需要自个儿注意，需要通气CO2的需要选择有透气滤膜的。边缘水的张力作祟总有部分细胞无法完全解离下来，边角细胞无法有效观察到，但操作安全，不容易污染。竖过来有刻度，适用于培养悬浮细胞。
培养板：细胞培养板常用于各种检测实验，如细胞克隆、划痕、细胞毒性实验等。可灵活选择通量，并且有多种表面处理方式，包括未处理/TC/PDL包被/low-binding，应用更广泛。培养贴壁细胞，通常是选用平底的U型，便于镜下观测、有明确的底面积、细胞培养液面高度相对一致。培养贴壁细胞可选择TC处理表面，表面未处理适合悬浮细胞培养。
估算细胞量
用低倍物镜观察。当细胞和细胞之间几乎完全不相邻时，细胞生长25%，细胞和细胞之间有一半相邻时，细胞生长50%，细胞和细胞基本上都相邻，但还有肉眼可辨别的较为空白区域时，细胞生长70%，细胞基本都相邻紧密时，生长90%，细胞长的叠起来，为长满了。
40%-50%的细胞密度通常适宜于病毒转染，因为此时的细胞生长状态最佳且转染效率较高；而80%的细胞密度则适合开展大多数常规实验，此时细胞数量充足且细胞间的相互作用处于理想状态。细胞密度达到90%时，通常需要考虑进行细胞传代或冻存。
关于培养基简述
一般拿到公司的试剂都搭配有说明书，应详细阅读培养基性质。
MEM培养基（Minimum Essential Medium）是Harry Eagle等在基本培养基（BEM）的基础上，对来源于人的细胞株进行更深入的研究后发现胞质内的氨基酸及维生素的含量比BEM中大1~5倍而且其中谷氨酰胺等13种氨基酸和8种维生素是必需的，于是将这些物质的浓度调整至接近细胞质内含量的水平，制成最低必需培养液。目的是提供一个更加简化的配方，以满足不同细胞的基本营养需求。
DMEM培养基（dulbecco’s modified eagle medium），Dulbecco在MEM基础上添加丙酮酸钠、非必须氨基酸，又增加了各成分的用量，DMEM含有相当于初始MEM的4倍浓度的氨基酸和维生素。DMEM有低糖基础培养基（LD）和高糖基础培养基（HD），两者差别在于葡萄糖的含量不同，低糖中葡萄糖含量为1000mg/L，而高糖中含葡萄糖4500mg/L。低糖被普遍用于干细胞的培养，可防止干细胞分化。高糖适合大多数哺乳动物的细胞，尤其是适用于生长较快、代谢旺盛或附着性差的肿瘤细胞，代谢活跃的细胞，低糖培养基无法提供足够的碳源。
MEM-EBSS（MEM Eagles withEarle’s Balanced Salts）是指 MEM中含有 Earle’s 平衡盐，用于CO2 培养箱。如果是无CO2 培养箱，则推荐使用含有 Hanks平衡盐的MEM。大部分实验室使用二氧化碳培养箱培养细胞，因此，MEM-EBSS使用范围更广，有些品牌索性在培养基名称上省略了EBSS，MEM就是指MEM-EBSS。平衡盐溶液主要以无机盐及葡萄糖配制而成。各种平衡盐溶液的主要不同点在于氯化钠的浓度、离子的浓度及缓冲系统不同。汉克斯(Hanks)液与厄尔(Earle)液不同，是因为采用不同的缓冲系统，在Hanks液中NaHCO3含量较低，为350mg/L，利用空气平衡，其缓冲能力较弱;Earle液则由于含有高浓度的NaHC03，为2.2g/L，其缓冲能力较强。需用5%CO2平衡。
MEM α (Minimum Essential Medium α)，一种改良的MEM培养基。与MEM培养基相比MEM α培养基营养更为丰富，在MEM的基础上又添加了NEAA、丙酮酸钠、硫酸锌、VB12、生物素、抗坏血酸等成分，广泛应用于各种哺乳动物悬浮和贴壁细胞的培养，包括角质形成细胞、原代大鼠星形胶质细胞和人黑色素瘤细胞。MEM α 还有不含核苷的版本，可用作 DG44 和其他 DHFR 阴性细胞的筛选培养基。
细胞操作台使用注意事项
- 细胞房白大褂与外面白大褂不要混用，戴好口罩、帽子，遵循细胞房生物安全与卫生规范进入。
- 每次使用前，先用紫外线灭菌灯照射30-50分钟，再用75%酒精擦洗台面，清除工作区内微生物。然后启动风机运转2分钟，随后才能进行相关实验操作。
- 洁净工作台周围不能存放那些不必要的物品，以免干扰到洁净气流流型。
- 要注意洁净工作台周围的气流变化，如果气流变弱，如酒精灯火焰不动，加大电机电压情况仍未改变，这说明滤器已阻塞，要及时更换。通常，高效过滤器3年换1次，要由专业人员来更换。此外，粗过滤器中的过滤布每3-6个月要清洗更换1次。（本研究所忽略）
- 使用完毕后要及时清理台面上的物品，并用酒精擦洗台面、清空废液缸后酒精喷洒清洗一遍，垃圾桶满了要记得丢垃圾。
- 每次操作只能处理一株细胞，以免造成细胞交叉污染。
- 实验操作应在操作台中央无菌区域内进行，勿在边缘非无菌区域操作。
- 勿碰触吸管与吸头头部或容器瓶口，勿打开的容器正上方操作实验。容器打开后，用手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约 45° 角取用，勿将瓶盖盖口朝上放在台面上
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